作者bbiioo (梅子)
看板Biotech
标题[讨论] sample buffer於室温下会变色
时间Fri Nov 20 08:38:17 2009
蛋白质的sample buffer
配置之後 以往是放在4度C保存
但是 有时後 拿出来时 会有沉淀的情况发生
应该是里面所含的SDS 所造成的现象
所以~後来就放在室温下了
结果 整瓶buffer的颜色 从原本的蓝 褪色成 偏绿
之後又变成浅浅的褐色
可是~拿去跑胶 跑出来的bane 还蛮正常的
所以,很疑问 到底他颜色变掉 会不会造成什麽影响??
那又是什麽导致变色(有听过人家说 是pH值的关系??)
另外 SAMPLE BUFFER配方如下
ddH2O 4ml
0.5M Tris-HCl pH6.8 1ml
glycerol 0.8ml
10%SDS 1.6ml
B-me 0.4ml
0.05% Bromophenol blue 0.2ml
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.130.38.65
1F:→ Fourfish:有颜色的是什麽成分?google一下不就知道了~?? 11/20 10:10
2F:推 tsubasawolfy:B-me吧 不加DTT或B-me的sample buffer都不会变色 11/20 11:41
3F:推 boblu:我家以前 2-ME 都是用前加。如此 sample buffer 可长放室温 11/20 12:48
4F:→ celestial318:同楼上 11/20 13:39
5F:→ KIKO880:我们家就算加了2-ME也是放室温,之前实验室是冰在-20会变 11/20 15:58
6F:→ KIKO880:橘黄色,拿去煮一下就回到蓝色了,老师说那是正常的 11/20 15:59
7F:→ chisarah:我们都有加B-me, 可是放在室温都没有变色 11/20 16:16
8F:→ chisarah:可是我们有加EDTA 11/20 16:18
9F:推 icome:beta-ME不是不稳定? 我放室温久了臭味都不见了... 11/20 16:33
10F:→ bbiioo:所以~颜色变化 不会影响就是罗?! 味道~放室温还是一样耶 11/20 17:37
11F:推 icome:有颜色变化代表pH变了... 11/20 17:48
12F:→ icome:Bromophenol blue is an acid-base indicator 11/20 17:49
13F:推 tincta:有加2-ME放室温,但是无变色+1 11/20 23:00
14F:推 Fourfish:不同温度Tris pH值不同 Bromophenol blue是酸硷指示剂 11/21 16:52
15F:→ Fourfish:buffer从4度到RT当然会变色 跟2-ME关系不大... 11/21 16:54
16F:推 damyr:pH值的关系,+1滴1M NaoH就好了,不过不加没什麽差 11/21 17:58
17F:→ bbiioo:恩 那pH值这样变化 对於跑胶 sample影响 大吗? 11/22 10:44
18F:→ skylawer:影响不大 因为电泳槽内的buffer远远超过sample 的量 11/24 23:39
19F:推 june0101:要看ph会不会影响2ME的还原力 若是DTT变色就没用了 12/09 00:09