作者chisarah (莎拉小姐)
看板Biotech
標題[討論] microinjection 的問題
時間Sun Nov 15 19:44:15 2009
近來我要把一個大約7500bps的plasmid 放進斑馬魚的胚胎中表現
首先我linearize了那個plasmid (大概7500bps)
purify了之後就與純水和phenol red 混合在一起
把混合物打進斑馬魚的胚胎中
24小時後在顯微鏡下觀察螢光蛋白的表現情況
可是我做了幾次都沒有什麼東西表示出來
反而有一次直接把plasmid打進斑馬魚的胚胎中, 40個胚胎宥1, 2個表現了那個螢光蛋白
可是那個螢光是很弱的
是不是我用錯了restriction enzyme 去linearlize那個plasmid呢?
還是因為那個linearized plasmid 太長而在魚中degrade了呢?
有沒有人知道microinjection最多可打多大size的plasmid呢?
謝謝各位的解答!!!
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◆ From: 119.246.147.135
1F：推 ookubo:RE切錯位置or打蛋的技術（40顆只有1,2顆太低） 我猜的啦~ 11/15 22:36
2F：→ cwpai:用enzyme切開後有做酒精沈澱嗎？聽說有影響...還有就是濃度 11/16 16:09