作者chisarah (莎拉小姐)
看板Biotech
标题[讨论] microinjection 的问题
时间Sun Nov 15 19:44:15 2009
近来我要把一个大约7500bps的plasmid 放进斑马鱼的胚胎中表现
首先我linearize了那个plasmid (大概7500bps)
purify了之後就与纯水和phenol red 混合在一起
把混合物打进斑马鱼的胚胎中
24小时後在显微镜下观察萤光蛋白的表现情况
可是我做了几次都没有什麽东西表示出来
反而有一次直接把plasmid打进斑马鱼的胚胎中, 40个胚胎宥1, 2个表现了那个萤光蛋白
可是那个萤光是很弱的
是不是我用错了restriction enzyme 去linearlize那个plasmid呢?
还是因为那个linearized plasmid 太长而在鱼中degrade了呢?
有没有人知道microinjection最多可打多大size的plasmid呢?
谢谢各位的解答!!!
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◆ From: 119.246.147.135
1F：推 ookubo:RE切错位置or打蛋的技术（40颗只有1,2颗太低） 我猜的啦~ 11/15 22:36
2F：→ cwpai:用enzyme切开後有做酒精沈淀吗？听说有影响...还有就是浓度 11/16 16:09