作者toocool5941 (黑)
看板Biotech
標題Re: [求救] 數細胞&分配細胞的方法??
時間Wed Nov 11 10:34:57 2009
※ 引述《toocool5941 (黑)》之銘言：
: ※ 引述《joynon (電腦真是個複雜的世界><)》之銘言：
: : 版上的各位版大好
: : 小妹我剛開始接觸cell culture
: : 雖然學長交過我怎嚜數細胞 但是我是有聽沒有懂
: : 所以想請板上的前輩們 能否詳細的附上單位的計算方法與過程
: : 小妹感激不盡^^
: : 請以下列條件做範例來計算
: : 4格細胞數/4=150
: : 要loading進well 40格
: : 每一格要有100λ的medium 內要有4000個細胞
: : 那要怎嚜分配才夠??
: : 感謝大家的幫忙^_________________^
: 4格細胞數 / 4 * 10^4 (計數盤體積) * 稀釋倍數 = 每ml的細胞數 (若要算總細胞數
: 再 * 容積)
: 例如
: 我若用trypan blue + 細胞 = 1:1 (被稀釋了兩倍)，且共有20ml
: 則等於600 / 4 * 10^4 * 2 * 20 = 6 * 10^7
: 你總共要40 * 4000 = 0.016 * 10^7個細胞
: 所以要取 20 ml : 6 = X : 0.016，X = 0.053 ml (0.053ml中含有0.016 * 10^7個細胞)
這個部份的意思，是說你的細胞總共有20ml當中，有6 * 10^7個細胞，
那取幾ml(設X)會有0.016 * 10^7個細胞呢
: 接著離心，再以4ml media resuspend(40 * 100)，則每100ul中有4000個細胞
你每格要100ul，共40格，所以100 * 40是你要resuspend的容量
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 120.101.28.208
1F：→ toocool5941:如music大所說，resuspend時應該要多估一點比較好 11/11 10:36
2F：推 tsubasawolfy:直覺式計算...算出每ml多少細胞後 直接用你所需要的 11/11 11:02
3F：→ tsubasawolfy:數目當分子 EX :16/300=0.053 (10^4會約掉就不放算式 11/11 11:04
4F：→ tsubasawolfy:0.053X1000uL=53uL 在加入你要的media體積 11/11 11:05