作者toocool5941 (黑)
看板Biotech
标题Re: [求救] 数细胞&分配细胞的方法??
时间Wed Nov 11 10:34:57 2009
※ 引述《toocool5941 (黑)》之铭言：
: ※ 引述《joynon (电脑真是个复杂的世界><)》之铭言：
: : 版上的各位版大好
: : 小妹我刚开始接触cell culture
: : 虽然学长交过我怎嚜数细胞 但是我是有听没有懂
: : 所以想请板上的前辈们 能否详细的附上单位的计算方法与过程
: : 小妹感激不尽^^
: : 请以下列条件做范例来计算
: : 4格细胞数/4=150
: : 要loading进well 40格
: : 每一格要有100λ的medium 内要有4000个细胞
: : 那要怎嚜分配才够??
: : 感谢大家的帮忙^_________________^
: 4格细胞数 / 4 * 10^4 (计数盘体积) * 稀释倍数 = 每ml的细胞数 (若要算总细胞数
: 再 * 容积)
: 例如
: 我若用trypan blue + 细胞 = 1:1 (被稀释了两倍)，且共有20ml
: 则等於600 / 4 * 10^4 * 2 * 20 = 6 * 10^7
: 你总共要40 * 4000 = 0.016 * 10^7个细胞
: 所以要取 20 ml : 6 = X : 0.016，X = 0.053 ml (0.053ml中含有0.016 * 10^7个细胞)
这个部份的意思，是说你的细胞总共有20ml当中，有6 * 10^7个细胞，
那取几ml(设X)会有0.016 * 10^7个细胞呢
: 接着离心，再以4ml media resuspend(40 * 100)，则每100ul中有4000个细胞
你每格要100ul，共40格，所以100 * 40是你要resuspend的容量
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 120.101.28.208
1F：→ toocool5941:如music大所说，resuspend时应该要多估一点比较好 11/11 10:36
2F：推 tsubasawolfy:直觉式计算...算出每ml多少细胞後 直接用你所需要的 11/11 11:02
3F：→ tsubasawolfy:数目当分子 EX :16/300=0.053 (10^4会约掉就不放算式 11/11 11:04
4F：→ tsubasawolfy:0.053X1000uL=53uL 在加入你要的media体积 11/11 11:05