作者greedman89 (天堂地獄)
看板Biotech
標題Re: [求救] 請問誰有MCF-7細胞 (台中)
時間Thu Nov 5 23:36:04 2009
※ 引述《mito0222 (MISA)》之銘言:
: ※ 引述《reinherd (揚威利信徒萊因哈特)》之銘言:
: : ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^
: : 換用這個培養基
: : RPMI 1640+10%FBS+1% Penn/Strip.
: : 我們不用DMEN養MCF7 這個拿來養231還不錯
: : 但是要注意一點 DMEN很多種 不同的glucose l-glutamate, 等等濃度
: : 所以建議不要只提DMEN 因該要提是哪一種DMEN
: 我們實驗室 過去都是用High glucose DMEM+10%FBS+1% PENN/STRIP.
: 問題是 現在解凍的都不太長 細胞型態很奇怪
: 還會出現怪怪的東西 但是確定培養基沒有污染
: 或是分盤之後漸漸死去
依我們實驗室的方法來看其實DMEM(Dulbecco's Modified Eagles Medium)
買Hi-D-GLUCOSE & Hi-L-glutamine的 在自行加上 1%的L-glutamine
還有1%的Pen/Strep 還有可以加入1% Sodium Pyruvate
這樣應該就可以養得起來了
另外就是就算是同一家做出來的血清可是因為是不同批的關係也會造成
細胞培養的差異所以像我們家的話就會盡量大量進貨
至於有沒有污染我想Mycoplasma最好還是驗一下看看用新的dish或是75T
隨便然後拿新的medium裝在裡面放到培養箱放個兩天然後拿去
驗看看會比較保險因為其本身也有些抗藥性尤其是盤尼西林(penicillin)
還有一個考量的點就是培養基的pH值基本上都以中性為主
7.2 - 7.3,可以倒一點出去用pH meter量量看基本上如果是買已經
泡好的培養基那個它應該都已經調好了,但如果是要自己泡的那就
要多注意一些了。不才的見解參考看看吧︿︿
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生如春花之絢爛,死如秋葉之靜美。
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◆ From: 210.70.83.46
1F:→ greedman89:忘記說了 10%的FBS 11/05 23:37
2F:→ milkpa:我們實驗室使用DMEM/F12 1:1 +10%FBS沒問題 11/06 10:23
3F:推 lchd:測看看mycoplasma吧 11/06 13:38
4F:推 reinherd:推 FBS不同批號有時候會有差別 11/07 04:46