作者greedman89 (天堂地狱)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问谁有MCF-7细胞 (台中)
时间Thu Nov 5 23:36:04 2009
※ 引述《mito0222 (MISA)》之铭言:
: ※ 引述《reinherd (扬威利信徒莱因哈特)》之铭言:
: : ^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^
: : 换用这个培养基
: : RPMI 1640+10%FBS+1% Penn/Strip.
: : 我们不用DMEN养MCF7 这个拿来养231还不错
: : 但是要注意一点 DMEN很多种 不同的glucose l-glutamate, 等等浓度
: : 所以建议不要只提DMEN 因该要提是哪一种DMEN
: 我们实验室 过去都是用High glucose DMEM+10%FBS+1% PENN/STRIP.
: 问题是 现在解冻的都不太长 细胞型态很奇怪
: 还会出现怪怪的东西 但是确定培养基没有污染
: 或是分盘之後渐渐死去
依我们实验室的方法来看其实DMEM(Dulbecco's Modified Eagles Medium)
买Hi-D-GLUCOSE & Hi-L-glutamine的 在自行加上 1%的L-glutamine
还有1%的Pen/Strep 还有可以加入1% Sodium Pyruvate
这样应该就可以养得起来了
另外就是就算是同一家做出来的血清可是因为是不同批的关系也会造成
细胞培养的差异所以像我们家的话就会尽量大量进货
至於有没有污染我想Mycoplasma最好还是验一下看看用新的dish或是75T
随便然後拿新的medium装在里面放到培养箱放个两天然後拿去
验看看会比较保险因为其本身也有些抗药性尤其是盘尼西林(penicillin)
还有一个考量的点就是培养基的pH值基本上都以中性为主
7.2 - 7.3,可以倒一点出去用pH meter量量看基本上如果是买已经
泡好的培养基那个它应该都已经调好了,但如果是要自己泡的那就
要多注意一些了。不才的见解参考看看吧︿︿
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生如春花之绚烂,死如秋叶之静美。
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◆ From: 210.70.83.46
1F:→ greedman89:忘记说了 10%的FBS 11/05 23:37
2F:→ milkpa:我们实验室使用DMEM/F12 1:1 +10%FBS没问题 11/06 10:23
3F:推 lchd:测看看mycoplasma吧 11/06 13:38
4F:推 reinherd:推 FBS不同批号有时候会有差别 11/07 04:46