作者aurth (呆瓜小笨豬)
看板Biotech
標題[求救] DNA fragmentation 做不出來
時間Thu Oct 29 02:34:23 2009
我們家BOSS從以前開始就一直想要有
Apoptosis positive control
但是不管我們用什麼方法
還是做不出來
像是把細胞拿去無菌操作台照UV(照了7天吧...活的好好的= =)
還是一般常見的H2O2(濃度上到1M了~細胞還是不會飄)
或是用會誘導凋亡的藥物(會抑制依賴Ca2+蛋白的活性)
拿去跑DNA電泳都是一條白白的(大約1kb)在那邊
就是不會有整管白的出現
最近也買了Caspase 3 的kit
也是什麼出現凋亡的現象
細胞的培養環境是在5%FBS的DMEM
細胞從Hep G2到NRK還是A549
全部都試過都沒有
跑PARP還是Bcl-2 或是抽Cytochrome C
通通沒有反應!
我都在想說我們家是不是可以轉行去研究抗老化了= =
細胞到我們家就是不會掛(翻桌)
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 122.122.217.173
1F：推 tsubasawolfy:隨便買個會在S phase造成DNA damage的CPT或DOX加下去 10/29 07:17
2F：→ tsubasawolfy:10uM管他哪種細胞都掛 10/29 07:18
3F：推 lazyQ:加 Nocodozole 10/29 11:42
4F：→ celestial318:....你家細胞真厲害 10/29 14:50
5F：→ DFS:時間點!?...以前實驗室的結果超過時間點也看不見成果了 10/29 19:28
6F：→ DFS:但抓對時間點做出一大條樓梯啦~! 10/29 19:28
7F：→ aurth:S期的藥也試過..細胞一樣會掛但是DNA跑不出來(會分成2條) 10/29 21:59
8F：→ aurth:時間點的話...這是個好建議(筆記)之前是做1.2.5.10.12.24hr 10/29 22:01
9F：→ aurth:但是都沒有出現想要的結果..最近改用Kit來抽也是沒有抽到 10/29 22:02
10F：→ aurth:今天跑PI結果也是沒反應..明天再試試用Annexin V染看看 10/29 22:05
11F：推 tsubasawolfy:有AV當然跑AV....ladder是個人認為最粗糙的方法.. 10/29 22:09
12F：→ aurth:註：Taxol 1mM細胞也沒掛(丟25T) 10/29 22:09
13F：→ tsubasawolfy:M phase的藥到底是不是apoptosis見仁見智.. 10/29 22:10
14F：→ aurth:只是本實驗室的那台流產細胞儀以經快變高級坐椅了= = 10/29 22:11
15F：→ aurth:可以請教一下CPT跟DOX的全名嗎 10/29 22:13
16F：推 tsubasawolfy:Camptothecin Doxorubicin 10/29 22:19