作者aurth (呆瓜小笨猪)
看板Biotech
标题[求救] DNA fragmentation 做不出来
时间Thu Oct 29 02:34:23 2009
我们家BOSS从以前开始就一直想要有
Apoptosis positive control
但是不管我们用什麽方法
还是做不出来
像是把细胞拿去无菌操作台照UV(照了7天吧...活的好好的= =)
还是一般常见的H2O2(浓度上到1M了~细胞还是不会飘)
或是用会诱导凋亡的药物(会抑制依赖Ca2+蛋白的活性)
拿去跑DNA电泳都是一条白白的(大约1kb)在那边
就是不会有整管白的出现
最近也买了Caspase 3 的kit
也是什麽出现凋亡的现象
细胞的培养环境是在5%FBS的DMEM
细胞从Hep G2到NRK还是A549
全部都试过都没有
跑PARP还是Bcl-2 或是抽Cytochrome C
通通没有反应!
我都在想说我们家是不是可以转行去研究抗老化了= =
细胞到我们家就是不会挂(翻桌)
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 122.122.217.173
1F：推 tsubasawolfy:随便买个会在S phase造成DNA damage的CPT或DOX加下去 10/29 07:17
2F：→ tsubasawolfy:10uM管他哪种细胞都挂 10/29 07:18
3F：推 lazyQ:加 Nocodozole 10/29 11:42
4F：→ celestial318:....你家细胞真厉害 10/29 14:50
5F：→ DFS:时间点!?...以前实验室的结果超过时间点也看不见成果了 10/29 19:28
6F：→ DFS:但抓对时间点做出一大条楼梯啦~! 10/29 19:28
7F：→ aurth:S期的药也试过..细胞一样会挂但是DNA跑不出来(会分成2条) 10/29 21:59
8F：→ aurth:时间点的话...这是个好建议(笔记)之前是做1.2.5.10.12.24hr 10/29 22:01
9F：→ aurth:但是都没有出现想要的结果..最近改用Kit来抽也是没有抽到 10/29 22:02
10F：→ aurth:今天跑PI结果也是没反应..明天再试试用Annexin V染看看 10/29 22:05
11F：推 tsubasawolfy:有AV当然跑AV....ladder是个人认为最粗糙的方法.. 10/29 22:09
12F：→ aurth:注：Taxol 1mM细胞也没挂(丢25T) 10/29 22:09
13F：→ tsubasawolfy:M phase的药到底是不是apoptosis见仁见智.. 10/29 22:10
14F：→ aurth:只是本实验室的那台流产细胞仪以经快变高级坐椅了= = 10/29 22:11
15F：→ aurth:可以请教一下CPT跟DOX的全名吗 10/29 22:13
16F：推 tsubasawolfy:Camptothecin Doxorubicin 10/29 22:19