作者godfinger123 (o_o)
看板Biotech
標題[求救] western
時間Thu Oct 15 13:23:59 2009
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章----
最近我取魚的組織作western，一開始電泳跑得很順利沒有問題。
但是transfer完以後把SDS-PAGE染色後發現gel的蛋白質都糊糊的一大片，但是用其他人
養細胞的樣品是沒有問題，不知道原因出在哪裡？
另外我發現加完ECL反應完後PVDF膜上面會出現棕黃色的band，也不知道是哪個關係造成的？以前做的時候PVDF膜都沒有band
產生？
作到快瘋掉了。
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.200.169
1F：→ turtle24:protein過量? 10/15 14:56
2F：→ dupeipei:PVDF membrane出現褐黃色是抗體太強或者protein load太多 10/15 16:12
3F：→ dupeipei:gel上蛋白質糊一大片，那PVDF membrane上band都正常？ 10/15 16:13
4F：→ dupeipei:是不是魚組織沒有均質完全？蛋白萃取都正常？ 10/15 16:15
5F：→ dupeipei:sample有煮過嗎？ 有煮過頭嗎？ 10/15 16:16
6F：推 dupeipei:除去以上因素還是如此的話...就可能電泳跑太快了0.0a 10/15 16:25