作者godfinger123 (o_o)
看板Biotech
标题[求救] western
时间Thu Oct 15 13:23:59 2009
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
最近我取鱼的组织作western，一开始电泳跑得很顺利没有问题。
但是transfer完以後把SDS-PAGE染色後发现gel的蛋白质都糊糊的一大片，但是用其他人
养细胞的样品是没有问题，不知道原因出在哪里？
另外我发现加完ECL反应完後PVDF膜上面会出现棕黄色的band，也不知道是哪个关系造成的？以前做的时候PVDF膜都没有band
产生？
作到快疯掉了。
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.121.200.169
1F：→ turtle24:protein过量? 10/15 14:56
2F：→ dupeipei:PVDF membrane出现褐黄色是抗体太强或者protein load太多 10/15 16:12
3F：→ dupeipei:gel上蛋白质糊一大片，那PVDF membrane上band都正常？ 10/15 16:13
4F：→ dupeipei:是不是鱼组织没有均质完全？蛋白萃取都正常？ 10/15 16:15
5F：→ dupeipei:sample有煮过吗？ 有煮过头吗？ 10/15 16:16
6F：推 dupeipei:除去以上因素还是如此的话...就可能电泳跑太快了0.0a 10/15 16:25