作者sjacky (陳小文)
看板Biotech
標題[求救] X-gal的染色都無法染上細胞
時間Sun Oct 11 19:46:53 2009
首先先提供X-gal的配法
依照
http://www.ihcworld.com/_protocols/special_stains/x_gal.htm 配置
先前染色都可以，最近兩個星期怎麼配置都無法成功染色
所有藥品都有重新確認過，也重新配置過
Potassium Ferricyanide Crystalline
Potassium Ferricyanide Trihydrate
Magnesium Chloride
都有注意，都沒有受潮
X-gal 儲存在-20C ， DMF 也是新的
cytospin打完後，用0.5%glutaraldehyde固定5min
再用PBS wash 三次，浸泡X-gal 37C 避光 overnight
隔天 PBS wash 三次，ddH2O wash 三次，99.5% EtOH 一次
顯微鏡看玻片，一點點藍藍的都沒有………
之前只要有染上，不用顯微鏡也看得到藍藍的，現在都沒有染上
麻煩請有作過相同實驗的先進，幫忙看看問題出在哪邊，謝謝
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◆ From: 61.64.23.20
1F：→ ymme:x-gal是fresh prepared嗎? 如果不是,可能要考慮保存條件 10/11 20:50
2F：→ ymme:就是會不好看或是沒有,所以都是現配 10/11 20:53