作者sjacky (陈小文)
看板Biotech
标题[求救] X-gal的染色都无法染上细胞
时间Sun Oct 11 19:46:53 2009
首先先提供X-gal的配法
依照
http://www.ihcworld.com/_protocols/special_stains/x_gal.htm 配置
先前染色都可以，最近两个星期怎麽配置都无法成功染色
所有药品都有重新确认过，也重新配置过
Potassium Ferricyanide Crystalline
Potassium Ferricyanide Trihydrate
Magnesium Chloride
都有注意，都没有受潮
X-gal 储存在-20C ， DMF 也是新的
cytospin打完後，用0.5%glutaraldehyde固定5min
再用PBS wash 三次，浸泡X-gal 37C 避光 overnight
隔天 PBS wash 三次，ddH2O wash 三次，99.5% EtOH 一次
显微镜看玻片，一点点蓝蓝的都没有………
之前只要有染上，不用显微镜也看得到蓝蓝的，现在都没有染上
麻烦请有作过相同实验的先进，帮忙看看问题出在哪边，谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.64.23.20
1F：→ ymme:x-gal是fresh prepared吗? 如果不是,可能要考虑保存条件 10/11 20:50
2F：→ ymme:就是会不好看或是没有,所以都是现配 10/11 20:53