作者coolmeow (誰能愛我100趴)
看板Biotech
標題[求救] 請問濾膜的選擇
時間Mon Oct 5 11:17:30 2009
請問版上有無版友製作過蛋白質（BSA）的溶劑PBS
想請問一些問題
1.直接使用sigma的PBS粉末
型號P-3813
PB=10mM
NaCl=138mM
KCl=2.7mM
請問這樣的成份對於BSA會不會有影響
2.請問PBS需要經過濾膜過濾嗎
要孔徑多大的濾膜？
濾膜的材質？
拜託請版上有相關經驗的人替小妹解答一下（跪求）
感激不盡
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.114.165
1F：推 chvkimo:請問你要過濾掉什麼? 滅菌嗎? 10/05 14:31
2F：→ missoul:一般過濾除菌=0.22um 10/05 20:01
3F：→ ZecAhau:PBS用0.22 um，材質一般的都可以。 10/05 21:47
4F：推 boblu:PBS 可以滅菌的吧？ 應該是溶了 BSA 以後若還需無菌才過濾？ 10/06 04:06
5F：推 leoblack:PBS先滅菌,然後配BSA,之後用0.22μm過水溶液用的材質過濾 10/06 09:01
6F：→ leoblack:沒必要買低蛋白沾黏的PVDF材質,又貴又難過濾 10/06 09:02
7F：推 chvkimo:召喚原PO~~ 10/06 11:52
8F：→ coolmeow:我是原PO 抱歉問的不清不楚的 10/06 14:44
9F：→ coolmeow:PBS的用途是當作BSA粉末的溶劑 而要過濾的主要目的是什麼 10/06 14:45
10F：→ coolmeow:我自己也不是很清楚 因為實驗室第一次做生醫相關的實驗 10/06 14:46
11F：→ coolmeow:我都是參考paper或碩論的步驟流程 但其實其中的主要目的 10/06 14:47
12F：→ coolmeow:我卻不是很清楚 囧~~ 10/06 14:47
13F：→ coolmeow:目前的實驗步驟是 要利用BSA非特異性的共價鍵結於COOH端 10/06 14:51
14F：→ coolmeow:所以需要BSA溶液浸泡sample 目前遇到的困難是不知如何 10/06 14:53
15F：→ coolmeow:正確的製作BSA溶液 10/06 14:54
16F：→ coolmeow:其中如 PBS的"標準成分 pH值 溫度",BSA的"濃度" 10/06 14:55
17F：→ coolmeow:還有過濾的話 濾膜的選擇 醋酸纖維? 硝酸纖維? 10/06 14:57
18F：→ coolmeow:或是其他我沒有sense的細節? 嗚嗚 > < 10/06 15:00
19F：→ coolmeow:若是板上有相關背景的大大 拜託請不吝指教 謝謝 10/06 15:03
20F：推 icome:化學實驗? 沒有用到細胞應該不用滅菌 不要有雜質就可以了 10/06 17:06