作者coolmeow (谁能爱我100趴)
看板Biotech
标题[求救] 请问滤膜的选择
时间Mon Oct 5 11:17:30 2009
请问版上有无版友制作过蛋白质（BSA）的溶剂PBS
想请问一些问题
1.直接使用sigma的PBS粉末
型号P-3813
PB=10mM
NaCl=138mM
KCl=2.7mM
请问这样的成份对於BSA会不会有影响
2.请问PBS需要经过滤膜过滤吗
要孔径多大的滤膜？
滤膜的材质？
拜托请版上有相关经验的人替小妹解答一下（跪求）
感激不尽
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.114.165
1F：推 chvkimo:请问你要过滤掉什麽? 灭菌吗? 10/05 14:31
2F：→ missoul:一般过滤除菌=0.22um 10/05 20:01
3F：→ ZecAhau:PBS用0.22 um，材质一般的都可以。 10/05 21:47
4F：推 boblu:PBS 可以灭菌的吧？ 应该是溶了 BSA 以後若还需无菌才过滤？ 10/06 04:06
5F：推 leoblack:PBS先灭菌,然後配BSA,之後用0.22μm过水溶液用的材质过滤 10/06 09:01
6F：→ leoblack:没必要买低蛋白沾黏的PVDF材质,又贵又难过滤 10/06 09:02
7F：推 chvkimo:召唤原PO~~ 10/06 11:52
8F：→ coolmeow:我是原PO 抱歉问的不清不楚的 10/06 14:44
9F：→ coolmeow:PBS的用途是当作BSA粉末的溶剂 而要过滤的主要目的是什麽 10/06 14:45
10F：→ coolmeow:我自己也不是很清楚 因为实验室第一次做生医相关的实验 10/06 14:46
11F：→ coolmeow:我都是参考paper或硕论的步骤流程 但其实其中的主要目的 10/06 14:47
12F：→ coolmeow:我却不是很清楚 囧~~ 10/06 14:47
13F：→ coolmeow:目前的实验步骤是 要利用BSA非特异性的共价键结於COOH端 10/06 14:51
14F：→ coolmeow:所以需要BSA溶液浸泡sample 目前遇到的困难是不知如何 10/06 14:53
15F：→ coolmeow:正确的制作BSA溶液 10/06 14:54
16F：→ coolmeow:其中如 PBS的"标准成分 pH值 温度",BSA的"浓度" 10/06 14:55
17F：→ coolmeow:还有过滤的话 滤膜的选择 醋酸纤维? 硝酸纤维? 10/06 14:57
18F：→ coolmeow:或是其他我没有sense的细节? 呜呜 > < 10/06 15:00
19F：→ coolmeow:若是板上有相关背景的大大 拜托请不吝指教 谢谢 10/06 15:03
20F：推 icome:化学实验? 没有用到细胞应该不用灭菌 不要有杂质就可以了 10/06 17:06