作者cclin (cclin)
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標題[求救] 關於小鼠尾靜脈注射~
時間Fri Sep 25 21:03:13 2009
最近進行幹細胞治療疾病的實驗
因實驗需求需將幹細胞由小鼠尾靜脈植入
結果發現一打進去老鼠99%都一下就抽蓄而死( CELL 濃度 5X10 5次方/150 ul)
因實驗需求無法將細胞濃度再降低
不知道有沒有人有一樣的情形..
想詢問是否有解決方法.
ps. 因常作小鼠尾靜脈注射,所以其他細胞 ex.腫瘤細胞都不會有這樣問題
只有用到幹細胞才遇到這樣的問題
煩請大家提供意見
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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◆ From: 140.128.153.200
1F：→ lamecies:是用PBS和幹細胞相溶嗎? PBS是否無菌&濃度正確? 09/25 21:25
2F：→ lamecies:幹細胞的宿主和實驗動物鼠同品系? 09/25 21:26
3F：→ lamecies:針筒是否有殘留空氣打入鼠體內? 09/25 21:27
4F：→ lamecies:因為你說常做尾部靜脈注射~技術上應該沒有問題 09/25 21:27
5F：→ lamecies:不然打到動脈也是有可能~我也是在做幹細胞尾靜脈注射 09/25 21:27
6F：→ lamecies:沒有遇過抽蓄死亡的問題~幹細胞活性是否健康也可測試看看 09/25 21:28
7F：→ lamecies:p.s 你用過腫瘤細胞尾靜脈注射!? 這樣老鼠更容易死吧.. 09/25 21:29
8F：推 vancent:不會吧?以前我們lab打cancer cell老鼠也都活得很好@@ 09/25 21:57
9F：→ vancent:只是META得亂七八糟XDDDDDDDD 09/25 21:57
10F：→ turtle24:幹細胞是否有表現什麼對老鼠可能會引起免疫反應或毒性? 09/25 22:29
11F：→ cclin:這次時在是因為打完後馬上死掉..才覺得困惑.. 09/25 22:53
12F：→ cclin:我是擔心是細胞聚集導致血管塞住.但也想不出什麼方法解決 09/25 22:54
13F：→ cclin:因在顯微鏡下觀察..感覺細胞比較容易聚集.但施打前我有打散 09/25 22:56
14F：→ JoannaC:那如果光是打NS就死過 而且死亡時有弓背嘴巴張大的樣子 請 09/26 16:31
15F：→ JoannaC:問是那裏出了問題?? (打的劑量<1ml,沒有打很快,沒有氣泡) 09/26 16:32
16F：→ turtle24:有麻醉嗎 09/26 22:49
17F：推 oopa:個人使用LLC約2x10^6細胞數就有機會出現原po說的狀況 09/28 13:19
18F：→ oopa:約有30%的死亡率,推測應該是細胞數太多導致栓塞等現象 09/28 13:20
19F：→ oopa:而這種細胞好像蠻容易聚集的,用細胞篩網篩過情況會好一些, 09/28 13:22
20F：→ oopa:而且篩完的網子上會看到有些明顯的碎片,可能是雜質或沒有洗掉 09/28 13:25
21F：→ oopa:的死細胞團之類的東西,這也可能是使老鼠立即死亡的元兇之一 09/28 13:26
22F：→ oopa:另外,打細胞前也要讓本來在冰上細胞液回溫,溫差太大對小鼠 09/28 13:28
23F：→ oopa:刺激也很厲害,我都將細胞液分成小管,使用前先用手握注回溫 09/28 13:29
24F：推 ZecAhau:覺得有氣泡或細胞沒打散這兩種可能性很高... 09/29 00:40
25F：→ oopa:對了,細胞濃度高時細胞液會濃稠,氣泡更容易滯留,要盡量排除 09/29 10:59
26F：→ JoannaC:->turtle24 沒有麻醉 純粹是打細胞前的練習.跟NS有關嗎? 09/29 21:15
27F：→ turtle24:最近手上往生的老鼠是有麻醉的 感覺血流變慢比較容易塞 09/29 21:32
28F：推 jbking:把細胞打散就對了 應該是細胞cluster導致急性血管栓塞 09/30 10:04