作者cclin (cclin)
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标题[求救] 关於小鼠尾静脉注射~
时间Fri Sep 25 21:03:13 2009
最近进行干细胞治疗疾病的实验
因实验需求需将干细胞由小鼠尾静脉植入
结果发现一打进去老鼠99%都一下就抽蓄而死( CELL 浓度 5X10 5次方/150 ul)
因实验需求无法将细胞浓度再降低
不知道有没有人有一样的情形..
想询问是否有解决方法.
ps. 因常作小鼠尾静脉注射,所以其他细胞 ex.肿瘤细胞都不会有这样问题
只有用到干细胞才遇到这样的问题
烦请大家提供意见
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.128.153.200
1F：→ lamecies:是用PBS和干细胞相溶吗? PBS是否无菌&浓度正确? 09/25 21:25
2F：→ lamecies:干细胞的宿主和实验动物鼠同品系? 09/25 21:26
3F：→ lamecies:针筒是否有残留空气打入鼠体内? 09/25 21:27
4F：→ lamecies:因为你说常做尾部静脉注射~技术上应该没有问题 09/25 21:27
5F：→ lamecies:不然打到动脉也是有可能~我也是在做干细胞尾静脉注射 09/25 21:27
6F：→ lamecies:没有遇过抽蓄死亡的问题~干细胞活性是否健康也可测试看看 09/25 21:28
7F：→ lamecies:p.s 你用过肿瘤细胞尾静脉注射!? 这样老鼠更容易死吧.. 09/25 21:29
8F：推 vancent:不会吧?以前我们lab打cancer cell老鼠也都活得很好@@ 09/25 21:57
9F：→ vancent:只是META得乱七八糟XDDDDDDDD 09/25 21:57
10F：→ turtle24:干细胞是否有表现什麽对老鼠可能会引起免疫反应或毒性? 09/25 22:29
11F：→ cclin:这次时在是因为打完後马上死掉..才觉得困惑.. 09/25 22:53
12F：→ cclin:我是担心是细胞聚集导致血管塞住.但也想不出什麽方法解决 09/25 22:54
13F：→ cclin:因在显微镜下观察..感觉细胞比较容易聚集.但施打前我有打散 09/25 22:56
14F：→ JoannaC:那如果光是打NS就死过 而且死亡时有弓背嘴巴张大的样子 请 09/26 16:31
15F：→ JoannaC:问是那里出了问题?? (打的剂量<1ml,没有打很快,没有气泡) 09/26 16:32
16F：→ turtle24:有麻醉吗 09/26 22:49
17F：推 oopa:个人使用LLC约2x10^6细胞数就有机会出现原po说的状况 09/28 13:19
18F：→ oopa:约有30%的死亡率,推测应该是细胞数太多导致栓塞等现象 09/28 13:20
19F：→ oopa:而这种细胞好像蛮容易聚集的,用细胞筛网筛过情况会好一些, 09/28 13:22
20F：→ oopa:而且筛完的网子上会看到有些明显的碎片,可能是杂质或没有洗掉 09/28 13:25
21F：→ oopa:的死细胞团之类的东西,这也可能是使老鼠立即死亡的元凶之一 09/28 13:26
22F：→ oopa:另外,打细胞前也要让本来在冰上细胞液回温,温差太大对小鼠 09/28 13:28
23F：→ oopa:刺激也很厉害,我都将细胞液分成小管,使用前先用手握注回温 09/28 13:29
24F：推 ZecAhau:觉得有气泡或细胞没打散这两种可能性很高... 09/29 00:40
25F：→ oopa:对了,细胞浓度高时细胞液会浓稠,气泡更容易滞留,要尽量排除 09/29 10:59
26F：→ JoannaC:->turtle24 没有麻醉 纯粹是打细胞前的练习.跟NS有关吗? 09/29 21:15
27F：→ turtle24:最近手上往生的老鼠是有麻醉的 感觉血流变慢比较容易塞 09/29 21:32
28F：推 jbking:把细胞打散就对了 应该是细胞cluster导致急性血管栓塞 09/30 10:04