作者auxotroph (autotroph)
看板Biotech
標題[求救] HL-60挑選stable clone
時間Tue Sep 15 01:01:46 2009
第一次製作stable clone 但要做飄的細胞 HL-60 ^^"
想請有經驗的板友給我ㄧ些建議
1.HL-60用什麼方式transfection會比較有效率
electroporation,Lipofectamine,FuGENE,DOTAP ?
2.關於挑選stable clone
貼的細胞好像比較容易分出死活及挑單一的clone
那飄的細胞是用limiting dilution嘛?(還是有其他方法?)
而進行limiting dilution時是要先全部養在一起篩(puro)
再分96孔挑單一;還是一開始就分到96孔盤
(細胞數是個問題,沒有gfp評估效率,太少長的起來嗎?還有如何換藥^^")
Google過找不太到到詳細的protocol,希望有經驗的板友給我ㄧ些建議 謝謝~
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◆ From: 118.168.14.153
1F：推 kaifish:drug selection ? 09/15 07:10
2F：→ kaifish:抱歉，沒看清楚問題 09/15 07:11
3F：推 williamyang:我是用lentivirus感染挑stable,不過我是用U937.應該和 09/15 19:41
4F：→ williamyang:HL60不會差到哪去才對. 09/15 19:42
5F：→ auxotroph:感謝推文及回信的板友^^ 09/25 00:49