作者auxotroph (autotroph)
看板Biotech
标题[求救] HL-60挑选stable clone
时间Tue Sep 15 01:01:46 2009
第一次制作stable clone 但要做飘的细胞 HL-60 ^^"
想请有经验的板友给我ㄧ些建议
1.HL-60用什麽方式transfection会比较有效率
electroporation,Lipofectamine,FuGENE,DOTAP ?
2.关於挑选stable clone
贴的细胞好像比较容易分出死活及挑单一的clone
那飘的细胞是用limiting dilution嘛?(还是有其他方法?)
而进行limiting dilution时是要先全部养在一起筛(puro)
再分96孔挑单一;还是一开始就分到96孔盘
(细胞数是个问题,没有gfp评估效率,太少长的起来吗?还有如何换药^^")
Google过找不太到到详细的protocol,希望有经验的板友给我ㄧ些建议 谢谢~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 118.168.14.153
1F：推 kaifish:drug selection ? 09/15 07:10
2F：→ kaifish:抱歉，没看清楚问题 09/15 07:11
3F：推 williamyang:我是用lentivirus感染挑stable,不过我是用U937.应该和 09/15 19:41
4F：→ williamyang:HL60不会差到哪去才对. 09/15 19:42
5F：→ auxotroph:感谢推文及回信的板友^^ 09/25 00:49