最近在表現一個膜蛋白的小片段要拿來做抗體，從hydropathy table和transmembrane domain prediction看起來，這個片段應該會以soluble form存在，不過換了幾個條件 都沒辦法把它以soluble form弄出來，所以後來就決定用含detergent的buffer去試著 把inclusion body裡的東西多洗一點出來，buffer的配方是參考這個網站： http://structbio.vanderbilt.edu/chazin/wisdom/labpro/inclusion.html 20 mM Na2HPO4, pH 7.2 20 mM NaCl 5 mM EDTA 25% (w/v) sucrose 1% Triton X-100 5mM β-mercaptoethanol 想請教的事情是，假如我要的蛋白確定溶在這裡面了，我可以直接把它拿去和Ni beads 或是Glutathione beads作用然後純化嗎？還是說裡面有哪些東西會把beads搞壞。 我自己的判斷是Ni column應該是不行因為裡面有EDTA。 又，有沒有人能告訴我為什麼裡面要加那麼多糖。 謝謝。 -- 即使消失也無妨全部重新開始也無所謂封上的心情與溫暖的肌膚令人無法理解而混沌不明是 可以替 很久以來我已遺忘天使與魔鬼在耳邊的低語 代的接納自己的焦躁與醜惡是無與倫比 的美麗但是誰來需要我吧害怕受到傷害其實我感受得到除了這一切一切以外你的存在我相信 心情變差了希望有誰來束縛我信任你擁有 所剩的不過是兩肩上灰色的黯淡人影 羞惡之心與 尊嚴拒絕一直這樣下去於是更為恐懼無比的希望下一個破壞差異與隔閡分辨善惡之能力智慧 與機巧然後走向夢 絮絮聒聒的要我如何如何罷了 與風的彼側來吧即使我的世界因此破碎。 --

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