最近在表现一个膜蛋白的小片段要拿来做抗体，从hydropathy table和transmembrane domain prediction看起来，这个片段应该会以soluble form存在，不过换了几个条件 都没办法把它以soluble form弄出来，所以後来就决定用含detergent的buffer去试着 把inclusion body里的东西多洗一点出来，buffer的配方是参考这个网站： http://structbio.vanderbilt.edu/chazin/wisdom/labpro/inclusion.html 20 mM Na2HPO4, pH 7.2 20 mM NaCl 5 mM EDTA 25% (w/v) sucrose 1% Triton X-100 5mM β-mercaptoethanol 想请教的事情是，假如我要的蛋白确定溶在这里面了，我可以直接把它拿去和Ni beads 或是Glutathione beads作用然後纯化吗？还是说里面有哪些东西会把beads搞坏。 我自己的判断是Ni column应该是不行因为里面有EDTA。 又，有没有人能告诉我为什麽里面要加那麽多糖。 谢谢。 -- 即使消失也无妨全部重新开始也无所谓封上的心情与温暖的肌肤令人无法理解而混沌不明是 可以替 很久以来我已遗忘天使与魔鬼在耳边的低语 代的接纳自己的焦躁与丑恶是无与伦比 的美丽但是谁来需要我吧害怕受到伤害其实我感受得到除了这一切一切以外你的存在我相信 心情变差了希望有谁来束缚我信任你拥有 所剩的不过是两肩上灰色的黯淡人影 羞恶之心与 尊严拒绝一直这样下去於是更为恐惧无比的希望下一个破坏差异与隔阂分辨善恶之能力智慧 与机巧然後走向梦 絮絮聒聒的要我如何如何罢了 与风的彼侧来吧即使我的世界因此破碎。 --

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