作者asdfghjkl819 (奇襲)
看板Biotech
標題[求救] 請問版上有做FISH的人嗎？
時間Sat Aug 29 22:28:40 2009
不知道版上有沒有做FISH的版友
我想請問關於石蠟包埋片子（sample來源為HCC）脫蠟的問題
因為老師說FISH的脫蠟方法與IHC的不一樣
所以我自己上網找了資料 在跟老師討論了一下
然後按照以下protocol做test
60度烘烤 15分 >>> Xylene 1,RT,1hour >>> Xylene 2,RT,30mins >>>
Xylene 3,RT,10mins >>> 100% ethanol,RT,10mins >>> 85% ethanol,RT,10mins >>>
70% ethanol,RT,20mins >>> 2X PBS wash 10mins >>> Fix
（以上步驟均有shake）
經過多次的test
甚至還聽老師的話將Xylene 1 的浸泡時間延長為四小時左右
試下來的結果probe仍舊bind不上去
我不知道問題出在哪裡
是我漏掉了什麼 還是哪裡做錯了？有其他需要注意的地方是我沒注意到的嗎？
請好心的版友告訴我
感激不盡 T＿T
另外，我聽說Xylene 作用太久會破壞片子是真的嗎？
那我這樣做用四個小時不就完了.....
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