作者asdfghjkl819 (奇袭)
看板Biotech
标题[求救] 请问版上有做FISH的人吗？
时间Sat Aug 29 22:28:40 2009
不知道版上有没有做FISH的版友
我想请问关於石蜡包埋片子（sample来源为HCC）脱蜡的问题
因为老师说FISH的脱蜡方法与IHC的不一样
所以我自己上网找了资料 在跟老师讨论了一下
然後按照以下protocol做test
60度烘烤 15分 >>> Xylene 1,RT,1hour >>> Xylene 2,RT,30mins >>>
Xylene 3,RT,10mins >>> 100% ethanol,RT,10mins >>> 85% ethanol,RT,10mins >>>
70% ethanol,RT,20mins >>> 2X PBS wash 10mins >>> Fix
（以上步骤均有shake）
经过多次的test
甚至还听老师的话将Xylene 1 的浸泡时间延长为四小时左右
试下来的结果probe仍旧bind不上去
我不知道问题出在哪里
是我漏掉了什麽 还是哪里做错了？有其他需要注意的地方是我没注意到的吗？
请好心的版友告诉我
感激不尽 T＿T
另外，我听说Xylene 作用太久会破坏片子是真的吗？
那我这样做用四个小时不就完了.....
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.35.2.85