作者gikilin ()
看板Biotech
標題[求救] 關於測cell proliferation
時間Tue Aug 18 17:36:27 2009
目前做實驗遇到一個瓶頸
我將一種cell line 讓他表現了一個gene之後
想要去測試proliferation能力是否增加
於是便用這兩種細胞(一個有表現,control是沒有表現那gene)去測MTT
但是...
我已經努力每個細胞都算了三次再取平均值去種細胞
經過一天後測MTT值沒有表現那gene的反而比較高
(但我一直覺得是我數的不精確)
結果也跟預期的不同
所以想問一下各位高手們
如何能夠確定一開始所種的細胞就是等數目呢？
或是能夠有其他方式測proliferation
我有想過用PI staining的方式去測cell cycle
但是PI staining似乎是比較適合差異性顯著的細胞
謝謝各位指點迷津~><
我會很感謝您的!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.25.228
1F：→ snkre:transfection efficiency高嗎? 08/18 19:26
2F：推 bigrat:有確定你數到的都是活細胞嗎? 08/18 22:27
3F：推 spermwarm:你的基因 會不會影響mitochondria本身的活性? 08/18 22:37
4F：→ gikilin:我的gene可以用puromycin去篩選 所以存活的都有transfect 08/18 22:41
5F：→ gikilin:我有染Trypan blue 去數耶 所以基本上是活細胞 08/18 22:42
6F：→ ymme:可以試crystal violet 08/19 22:42
7F：推 inveigh:最近遇到相似問題,老闆也說用樓上的方法 結晶紫 08/21 00:10
8F：→ flywind1209:crystal violet 真的蠻快速又好用的!! 08/30 18:39
9F：→ flywind1209:所以表現那個基因的CELL 是經過篩選混合在一起的? 08/30 18:40