作者gikilin ()
看板Biotech
标题[求救] 关於测cell proliferation
时间Tue Aug 18 17:36:27 2009
目前做实验遇到一个瓶颈
我将一种cell line 让他表现了一个gene之後
想要去测试proliferation能力是否增加
於是便用这两种细胞(一个有表现,control是没有表现那gene)去测MTT
但是...
我已经努力每个细胞都算了三次再取平均值去种细胞
经过一天後测MTT值没有表现那gene的反而比较高
(但我一直觉得是我数的不精确)
结果也跟预期的不同
所以想问一下各位高手们
如何能够确定一开始所种的细胞就是等数目呢？
或是能够有其他方式测proliferation
我有想过用PI staining的方式去测cell cycle
但是PI staining似乎是比较适合差异性显着的细胞
谢谢各位指点迷津~><
我会很感谢您的!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.25.228
1F：→ snkre:transfection efficiency高吗? 08/18 19:26
2F：推 bigrat:有确定你数到的都是活细胞吗? 08/18 22:27
3F：推 spermwarm:你的基因 会不会影响mitochondria本身的活性? 08/18 22:37
4F：→ gikilin:我的gene可以用puromycin去筛选 所以存活的都有transfect 08/18 22:41
5F：→ gikilin:我有染Trypan blue 去数耶 所以基本上是活细胞 08/18 22:42
6F：→ ymme:可以试crystal violet 08/19 22:42
7F：推 inveigh:最近遇到相似问题,老板也说用楼上的方法 结晶紫 08/21 00:10
8F：→ flywind1209:crystal violet 真的蛮快速又好用的!! 08/30 18:39
9F：→ flywind1209:所以表现那个基因的CELL 是经过筛选混合在一起的? 08/30 18:40