作者glencan (為了更好的未來)
看板Biotech
標題[求救]細胞培養
時間Thu Aug 13 23:52:18 2009
繼組織萃取後...又一大問題
小弟我目前培養的細胞是C2C12
在這個七八月曾發生很不可思議的事情-->解凍後無法順利生長
因為以前也有用同批的細胞解凍過,都安好長大.
不過最近解凍細胞後,往往都無法順利貼附生長(一整個漂)
不然就是長的不好(生長緩慢&型態外觀畸形)
========================================================================
凍細胞的流程和冷凍培養基以及medium完全按照食科所protocal配製,新鮮的;
細胞冷凍是放在冷凍盒,並置於-70度冰箱,o/n後再移至液態氮保存;
incubator條件都ok;
解凍後馬上放入10cm dish培養;
細胞若有貼附,大約12小時內就更換medium.
想請問一下有哪些地方我疏忽了?
或是有哪位大大以前也有遇過這樣的問題?
謝謝
=========================================================================
這次問題想不出原因是因為:
現在跟以前的操作方法 (不論凍細胞 或 解凍細胞) 或是 medium等溶液,
都是一模一樣的,
不過以前都長的很強壯;現在它就是長不起來阿阿阿阿 >"<
話說C2C12不是很強壯的細胞嗎?!
怎麼在我最需要你的時候,沒有說一句話就走了 Q口Q
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.227.179
1F：→ turtle24:液態氮桶有出過問題嗎 08/13 23:56
2F：→ cyh110532:細胞密度夠嗎? 08/14 10:28
3F：→ ordinary07:我也養C2C12 這個暑假就是一直飄阿飄... 08/14 10:35
4F：→ glencan:恩恩 液態氮桶沒出過問題,且都有保持至少半滿 08/14 16:00
5F：→ glencan:細胞密度當初每管約8~全滿 (無疊起) 08/14 16:01
6F：→ glencan:3樓...希望我們可以早日度過這個難關 >"< 08/14 16:02
7F：→ bluerstars:你們只有c2c12有這個情形嗎...別人的細胞ok嗎 08/15 02:10
8F：→ glencan:別人的STO,在這次的解凍也是漂光光... @0@ 08/15 11:13
9F：→ glencan:培養箱和水盤都有清理過,培養條件顯示也是ok的... 08/15 11:14
10F：→ glencan:恩...我再檢查一次培養箱好了 = ==+ 08/15 11:14
11F：→ toocool5941:細胞數多少?每管幾ml? 08/18 18:58
12F：→ glencan:約6*10六次方,一管1cc 08/18 21:05
13F：→ joyce886616:你會不會是在把細胞打入medium的時候打太快了呢? 06/03 13:48
14F：→ joyce886616:因為它沒有辦法馬上適應37度C的溫度,就會漂...... 06/03 13:50