作者glencan (为了更好的未来)
看板Biotech
标题[求救]细胞培养
时间Thu Aug 13 23:52:18 2009
继组织萃取後...又一大问题
小弟我目前培养的细胞是C2C12
在这个七八月曾发生很不可思议的事情-->解冻後无法顺利生长
因为以前也有用同批的细胞解冻过,都安好长大.
不过最近解冻细胞後,往往都无法顺利贴附生长(一整个漂)
不然就是长的不好(生长缓慢&型态外观畸形)
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冻细胞的流程和冷冻培养基以及medium完全按照食科所protocal配制,新鲜的;
细胞冷冻是放在冷冻盒,并置於-70度冰箱,o/n後再移至液态氮保存;
incubator条件都ok;
解冻後马上放入10cm dish培养;
细胞若有贴附,大约12小时内就更换medium.
想请问一下有哪些地方我疏忽了?
或是有哪位大大以前也有遇过这样的问题?
谢谢
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这次问题想不出原因是因为:
现在跟以前的操作方法 (不论冻细胞 或 解冻细胞) 或是 medium等溶液,
都是一模一样的,
不过以前都长的很强壮;现在它就是长不起来阿阿阿阿 >"<
话说C2C12不是很强壮的细胞吗?!
怎麽在我最需要你的时候,没有说一句话就走了 Q口Q
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◆ From: 140.127.227.179
1F：→ turtle24:液态氮桶有出过问题吗 08/13 23:56
2F：→ cyh110532:细胞密度够吗? 08/14 10:28
3F：→ ordinary07:我也养C2C12 这个暑假就是一直飘阿飘... 08/14 10:35
4F：→ glencan:恩恩 液态氮桶没出过问题,且都有保持至少半满 08/14 16:00
5F：→ glencan:细胞密度当初每管约8~全满 (无叠起) 08/14 16:01
6F：→ glencan:3楼...希望我们可以早日度过这个难关 >"< 08/14 16:02
7F：→ bluerstars:你们只有c2c12有这个情形吗...别人的细胞ok吗 08/15 02:10
8F：→ glencan:别人的STO,在这次的解冻也是漂光光... @0@ 08/15 11:13
9F：→ glencan:培养箱和水盘都有清理过,培养条件显示也是ok的... 08/15 11:14
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11F：→ toocool5941:细胞数多少?每管几ml? 08/18 18:58
12F：→ glencan:约6*10六次方,一管1cc 08/18 21:05
13F：→ joyce886616:你会不会是在把细胞打入medium的时候打太快了呢? 06/03 13:48
14F：→ joyce886616:因为它没有办法马上适应37度C的温度,就会漂...... 06/03 13:50