作者kotenka (Egg Dance)
看板Biotech
標題[方法] 要抽RNA的tissue保存?
時間Thu Aug 13 12:41:35 2009
大家好，因為學姐畢業而新生又還沒訓練好
所以現在收一組老鼠的後續實驗全都是我一個人做
要花一整天上flow(染surface marker和ICS甚至還有tetramer)
還要做epidermal sheet以及cryosection
最後就是抽RNA然後做real-time
想請問那些tissue(包括lymph node, spleen, skin)我該如何保存
skin我平常是加液態氮之後用研缽磨碎再homogenize然後加Trizol
LN和spleen就是直接homogenize加Trizol
是該處理好溶在Trizol後放-80度保存嗎？
還是乾脆tissue都先不要磨，直接放-80度隔天再抽就好？
謝謝回答
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 211.76.175.170
1F：推 andy731:我的經驗是預先磨的組織保存在TRIzol中 得控制好樣品重量 08/13 13:01
2F：→ andy731:否則樣品非常容易降解，跑RNA電泳就知道樣品狀況很不妙 08/13 13:03
3F：→ andy731:尤其是spleen最嚴重 08/13 13:04
4F：→ andy731:我的做法是 將摘取下的組織放在eppendrof泡在TRIzol中， 08/13 13:10
5F：→ andy731:然後直接用液態氮快速凍結 放-80凍藏 08/13 13:10
6F：→ andy731:要做實驗的時候再取出即可 08/13 13:11
7F：→ kotenka:感謝樓上回答 08/13 15:39
8F：推 jinnkiwa:我們是將sample放在eppendrof加液態氮冰凍再放入-80冰箱 08/14 10:50