作者kotenka (Egg Dance)
看板Biotech
标题[方法] 要抽RNA的tissue保存?
时间Thu Aug 13 12:41:35 2009
大家好，因为学姐毕业而新生又还没训练好
所以现在收一组老鼠的後续实验全都是我一个人做
要花一整天上flow(染surface marker和ICS甚至还有tetramer)
还要做epidermal sheet以及cryosection
最後就是抽RNA然後做real-time
想请问那些tissue(包括lymph node, spleen, skin)我该如何保存
skin我平常是加液态氮之後用研钵磨碎再homogenize然後加Trizol
LN和spleen就是直接homogenize加Trizol
是该处理好溶在Trizol後放-80度保存吗？
还是乾脆tissue都先不要磨，直接放-80度隔天再抽就好？
谢谢回答
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 211.76.175.170
1F：推 andy731:我的经验是预先磨的组织保存在TRIzol中 得控制好样品重量 08/13 13:01
2F：→ andy731:否则样品非常容易降解，跑RNA电泳就知道样品状况很不妙 08/13 13:03
3F：→ andy731:尤其是spleen最严重 08/13 13:04
4F：→ andy731:我的做法是 将摘取下的组织放在eppendrof泡在TRIzol中， 08/13 13:10
5F：→ andy731:然後直接用液态氮快速冻结 放-80冻藏 08/13 13:10
6F：→ andy731:要做实验的时候再取出即可 08/13 13:11
7F：→ kotenka:感谢楼上回答 08/13 15:39
8F：推 jinnkiwa:我们是将sample放在eppendrof加液态氮冰冻再放入-80冰箱 08/14 10:50