作者glencan (為了更好的未來)
看板Biotech
標題Re: [求救] 組織均質後做western
時間Wed Aug 12 13:25:21 2009
補充一下,
今天把轉漬後的膠拿去stain,發現蛋白質沒有被分離
(正常狀況應該都可以看到一條一條的水平single band,
不過我的感覺就像心電圖那樣歪歪曲曲的,有些甚至看不到single band)
難怪連Actin也壓不出來...因為根本沒有分離嘛~ Q皿Q
老闆說可能是組織的黏蛋白太多了~!!
目前想到的辦法是組織均質完後,再拿去sonicate久一點,
不知道是不是因為組織不純所以導致我均質後的蛋白質萃取有問題...
或是有其他技術性的問題我忽略了?
謝謝
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.227.175
1F：推 rele:sonicate次數增加..離心加到30分...確定離心後取上清液不會 08/13 01:21
2F：→ rele:太黏稠才定量....如果還是太黏就要再sonicate再離心... 08/13 01:26
3F：→ glencan:恩 謝謝^^ 接下來就是看western成不成功了 ==皿==+ 08/13 16:29