作者glencan (为了更好的未来)
看板Biotech
标题Re: [求救] 组织均质後做western
时间Wed Aug 12 13:25:21 2009
补充一下,
今天把转渍後的胶拿去stain,发现蛋白质没有被分离
(正常状况应该都可以看到一条一条的水平single band,
不过我的感觉就像心电图那样歪歪曲曲的,有些甚至看不到single band)
难怪连Actin也压不出来...因为根本没有分离嘛~ Q皿Q
老板说可能是组织的黏蛋白太多了~!!
目前想到的办法是组织均质完後,再拿去sonicate久一点,
不知道是不是因为组织不纯所以导致我均质後的蛋白质萃取有问题...
或是有其他技术性的问题我忽略了?
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.127.227.175
1F：推 rele:sonicate次数增加..离心加到30分...确定离心後取上清液不会 08/13 01:21
2F：→ rele:太黏稠才定量....如果还是太黏就要再sonicate再离心... 08/13 01:26
3F：→ glencan:恩 谢谢^^ 接下来就是看western成不成功了 ==皿==+ 08/13 16:29