最近小弟初碰IHC 可是做切片前的固定有點搞不定 雖然是照著實驗室的protocol還是固定不太好 以下是我們Lab的protocol: (所取組織:多是 CNS) 1.從左心間插入 灌入冰saline 50~100 cc 流速近乎最大 接著在右心房剪洞 (將老鼠體內的血沖出) 2.等saline流完後 灌入4%福馬琳同老鼠體重的cc數(ex.Rat:200g formalin:200cc) 並且分成兩種流速 一開始用近乎全速 剩一半後 再以約 1 drop/s 的方式固定 3.由於我們都有先做過前處理 我不知道一些蛋白質的活性 會不會因為福馬林太多或太濃 就降低甚至消失 我以前學過的方式是取下組織後浸泡福馬琳 再視組織條件 調整泡福馬琳時間 可是我不知道這方法適不適用於 處理過的老鼠 我很怕等固定好要抗的東西就失活了ˊˋ 懇請各位前輩們可以提供小的一些意見或參考protocol亦或是相關學習管道 只要各位前輩們肯敎 小的很樂意多方面吸收學習的 P.S 我們家是用冷凍切片 但我們家的protocol還是要做固定= =" (雖說是冷切 但不是常見的一台有完整冷卻系統那種 而是一般"非滾輪式的切片機"+"水冷系統" `囧rz ) 拜託各位前輩了!!> <" -- 如果能贏 誰想輸... 如果能成功 誰想失敗... 如果未來會更好 誰還會停滯不前... --

※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.170.2.77 恩...固定後 組織還是軟軟的 無法達到之前學長姐作的標準 ※ 編輯: ddlittleq 來自: 118.170.120.178 (08/16 01:08)