最近小弟初碰IHC 可是做切片前的固定有点搞不定 虽然是照着实验室的protocol还是固定不太好 以下是我们Lab的protocol: (所取组织:多是 CNS) 1.从左心间插入 灌入冰saline 50~100 cc 流速近乎最大 接着在右心房剪洞 (将老鼠体内的血冲出) 2.等saline流完後 灌入4%福马琳同老鼠体重的cc数(ex.Rat:200g formalin:200cc) 并且分成两种流速 一开始用近乎全速 剩一半後 再以约 1 drop/s 的方式固定 3.由於我们都有先做过前处理 我不知道一些蛋白质的活性 会不会因为福马林太多或太浓 就降低甚至消失 我以前学过的方式是取下组织後浸泡福马琳 再视组织条件 调整泡福马琳时间 可是我不知道这方法适不适用於 处理过的老鼠 我很怕等固定好要抗的东西就失活了ˊˋ 恳请各位前辈们可以提供小的一些意见或参考protocol亦或是相关学习管道 只要各位前辈们肯敎 小的很乐意多方面吸收学习的 P.S 我们家是用冷冻切片 但我们家的protocol还是要做固定= =" (虽说是冷切 但不是常见的一台有完整冷却系统那种 而是一般"非滚轮式的切片机"+"水冷系统" `囧rz ) 拜托各位前辈了!!> <" -- 如果能赢 谁想输... 如果能成功 谁想失败... 如果未来会更好 谁还会停滞不前... --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 118.170.2.77 恩...固定後 组织还是软软的 无法达到之前学长姐作的标准 ※ 编辑: ddlittleq 来自: 118.170.120.178 (08/16 01:08)