作者schmitt (小密特)
看板Biotech
標題Re: [求救] 請問轉基因鼠怎麼分wt和mutant?
時間Fri Aug 7 17:48:36 2009
想要搭個便車問問題
我有200多隻老鼠 聽學長說是 B6 和 FVB 生出來的
那我如果想要知道這些老鼠那隻是比較靠近 B6 的鼠種
請問我要怎麼去測量呢
※ 引述《kaifish (喔.....................)》之銘言：
: ※ 引述《hickory (C'est la vie)》之銘言：
: : 請問一下板上有在做老鼠的學長姐們 小弟念到一篇論文，用老鼠來做
: : MECP2基因缺失的實驗。這篇文在材料方法中提到
: : All of the mice used in these experiments were generated by crossing
: : heterozygous female Mecp2 Flox/+ mice that had been backcrossed to
: : 129S6/SvEvTac for at least five generations to male mice on either a pure
: : FVB/N background or male mice on a pure C57BL/6J background to generate
: : isogenic F1 animals. Only male animals were used for all the experiments
: : listed with WT littermate males serving as the controls.
: : 我自己對這一段的理解是 他用 129S6 ，基因型 XX 的母鼠 和
: : FVBN、C57BL/6J 兩種品系的公鼠去交配，變成 XX XY
: : (此基因X-Link，X代表某基因被Knokout，X是正常性染色體)
: : 生出子代的公鼠有兩種，一種是 XY ，一種 XY
: : XY 拿來做實驗；XY當作 wild type control
: : 但我的問題是，實驗者怎麼知道這隻老鼠是 XY 還是 XY ？
: : 想了很久，不得其解，來版上請學長姐不吝賜教
: : 附上原文 http://www.badongo.com/file/15942038
: 從內文看來，floxed allele仍保留neo cassette
: 所以 WT 的 X染色體與floxed X染色體之間，長度就有差異(neo cassette約 2 Kb)
: 因此只要切小鼠的尾巴抽DNA
: 利用PCR或是Southern blot就可以看出小鼠的 X 染色體是WT 或 floxed allele
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◆ From: 219.85.86.155
1F：推 albert12:通常F1一定是各帶一半 如果硬要分的話 黑鼠偏B6一點 08/08 23:29
2F：→ schmitt:哭 那棕色的怎麼辦 08/11 16:20