作者schmitt (小密特)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问转基因鼠怎麽分wt和mutant?
时间Fri Aug 7 17:48:36 2009
想要搭个便车问问题
我有200多只老鼠 听学长说是 B6 和 FVB 生出来的
那我如果想要知道这些老鼠那只是比较靠近 B6 的鼠种
请问我要怎麽去测量呢
※ 引述《kaifish (喔.....................)》之铭言：
: ※ 引述《hickory (C'est la vie)》之铭言：
: : 请问一下板上有在做老鼠的学长姐们 小弟念到一篇论文，用老鼠来做
: : MECP2基因缺失的实验。这篇文在材料方法中提到
: : All of the mice used in these experiments were generated by crossing
: : heterozygous female Mecp2 Flox/+ mice that had been backcrossed to
: : 129S6/SvEvTac for at least five generations to male mice on either a pure
: : FVB/N background or male mice on a pure C57BL/6J background to generate
: : isogenic F1 animals. Only male animals were used for all the experiments
: : listed with WT littermate males serving as the controls.
: : 我自己对这一段的理解是 他用 129S6 ，基因型 XX 的母鼠 和
: : FVBN、C57BL/6J 两种品系的公鼠去交配，变成 XX XY
: : (此基因X-Link，X代表某基因被Knokout，X是正常性染色体)
: : 生出子代的公鼠有两种，一种是 XY ，一种 XY
: : XY 拿来做实验；XY当作 wild type control
: : 但我的问题是，实验者怎麽知道这只老鼠是 XY 还是 XY ？
: : 想了很久，不得其解，来版上请学长姐不吝赐教
: : 附上原文 http://www.badongo.com/file/15942038
: 从内文看来，floxed allele仍保留neo cassette
: 所以 WT 的 X染色体与floxed X染色体之间，长度就有差异(neo cassette约 2 Kb)
: 因此只要切小鼠的尾巴抽DNA
: 利用PCR或是Southern blot就可以看出小鼠的 X 染色体是WT 或 floxed allele
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◆ From: 219.85.86.155
1F：推 albert12:通常F1一定是各带一半 如果硬要分的话 黑鼠偏B6一点 08/08 23:29
2F：→ schmitt:哭 那棕色的怎麽办 08/11 16:20