作者smailyung (Yun)
看板Biotech
標題[求救] 請問溶血會不會影響抽取白血球DNA的品質~
時間Fri Jul 24 12:52:13 2009
各位版大好~
我想問的問題就跟標題一樣~
"溶血會不會影響抽取白血球DNA的品質~"
我是要從豬隻的全血中抽取DNA，目前找到的步驟大致是這樣~
1.將抽出的血液放入紫頭(含EDTA)的採血管中，混合均勻
2.離心3000rpm15分鐘後，抽取白血球層(buffy coat)
3.以下就用Kit開始萃取
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現在遇到的問題就是...在採血的過程中....
針頭的大小可能會太小....會怕造成紅血球破裂
(通常會用19或是18 G的針頭，可是目前使用的是21G)
自己是覺得...應該是不會影響到...
但是為了萬一....所以還是請問各位版大~~~
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感謝各位~~~~~
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◆ From: 140.137.70.57
1F：→ nutahoshi:但如果是輕微溶血的話因該是還好~ 07/24 14:44
2F：推 rickson:不會 不用擔心 抽DNA我還特別去溶血 07/24 15:26
3F：推 ROKEE:不會 我們做TB菌PCR還特別加全血3倍體積的二次水破細胞咧 07/24 16:09
4F：→ schmitt:完全不會有問題....請暴力的打破細胞 07/25 21:52
5F：→ schmitt:挖哩勒打太快..再抽buffy coat之前溶血不要太嚴重 07/25 21:55
6F：→ schmitt:抽完buffy coat就可以快樂的打破在下面的紅血球了 07/25 21:55
8F：→ schmitt:這還不錯 網路上隨便找的 07/25 22:14
9F：→ schmitt:不過..heparin 不會造成血液凝塊...吧 07/25 22:16