作者smailyung (Yun)
看板Biotech
标题[求救] 请问溶血会不会影响抽取白血球DNA的品质~
时间Fri Jul 24 12:52:13 2009
各位版大好~
我想问的问题就跟标题一样~
"溶血会不会影响抽取白血球DNA的品质~"
我是要从猪只的全血中抽取DNA，目前找到的步骤大致是这样~
1.将抽出的血液放入紫头(含EDTA)的采血管中，混合均匀
2.离心3000rpm15分钟後，抽取白血球层(buffy coat)
3.以下就用Kit开始萃取
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现在遇到的问题就是...在采血的过程中....
针头的大小可能会太小....会怕造成红血球破裂
(通常会用19或是18 G的针头，可是目前使用的是21G)
自己是觉得...应该是不会影响到...
但是为了万一....所以还是请问各位版大~~~
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感谢各位~~~~~
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◆ From: 140.137.70.57
1F：→ nutahoshi:但如果是轻微溶血的话因该是还好~ 07/24 14:44
2F：推 rickson:不会 不用担心 抽DNA我还特别去溶血 07/24 15:26
3F：推 ROKEE:不会 我们做TB菌PCR还特别加全血3倍体积的二次水破细胞咧 07/24 16:09
4F：→ schmitt:完全不会有问题....请暴力的打破细胞 07/25 21:52
5F：→ schmitt:挖哩勒打太快..再抽buffy coat之前溶血不要太严重 07/25 21:55
6F：→ schmitt:抽完buffy coat就可以快乐的打破在下面的红血球了 07/25 21:55
8F：→ schmitt:这还不错 网路上随便找的 07/25 22:14
9F：→ schmitt:不过..heparin 不会造成血液凝块...吧 07/25 22:16