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最近有個實驗是要找出 Chemical labeling 片段 目前想用 MS 來做 我們實驗室並沒有經驗 最近幾次跑 MALDI-TOF 結果都沒有訊號 Orz... (結果都是小分子,應該是鹽類) 樣品是 Purified Membrane Protein 附近實驗室都是走2-D膠 → In-gel Digestion流程 所以不知道我們的步驟那邊有問題 希望可以在這裡求到解答 以下是實驗流程: 純化的 Protein (10-20 ug in 200λ),加入 Chemical (對照組則不加) ↓ 反應完用濃縮管除去鹽類、未反應的 Chemical,並以純水清洗三次 ↓ 濃縮後的體積約 50 λ,加入 Trypsin (1:20),37℃ 16 hr Trypsin 購自 Promega (Sequencing Grade) ↓ Trypsin 作用完,抽真空去除水,交給技術員跑MALDI-TOF 以上... 先謝大家了 >"< --



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