作者pandsun (天才小p)
看板Biotech
標題[求救] 請問Northern blot的internal control如何一致
時間Mon Jul 6 00:25:41 2009
最近在做Northern的實驗
要比較藥劑處理後跟對照組的差別
可是在跑RNA gel時都不能有效的將28s rRNA跑好
讓每個處理的亮度(濃度)相當
在事前已經先使用過A260/A280定量過了
可是算出來的量就是跟跑膠後的不同
依照照膠系統的定量重新跑膠也不準
看前面的文章，有人似乎是用肉眼去抓條件，然後一直跑到OK為止
但是RNA sample也不是很多(一次還要load 20ul)這樣下去很浪費
就可能只能做一個基因就沒搞頭了，不知道有沒有什麼可能的改進方法
還有有人有嚐試過Reprobing的動作嗎，目前試驗室這個還沒試出來
現在跟學長頭都抱著燒了
麻煩好心人士指點迷津~~@@
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◆ From: 140.120.196.126
1F：→ hek:reprobe不會很難,重點是不要讓membrane乾掉 07/06 00:41
2F：→ hek:通常0.1%SSC/1%SDS 80-90deg 10min就足以去除掉大部分的訊號 07/06 00:42