作者pandsun (天才小p)
看板Biotech
标题[求救] 请问Northern blot的internal control如何一致
时间Mon Jul 6 00:25:41 2009
最近在做Northern的实验
要比较药剂处理後跟对照组的差别
可是在跑RNA gel时都不能有效的将28s rRNA跑好
让每个处理的亮度(浓度)相当
在事前已经先使用过A260/A280定量过了
可是算出来的量就是跟跑胶後的不同
依照照胶系统的定量重新跑胶也不准
看前面的文章，有人似乎是用肉眼去抓条件，然後一直跑到OK为止
但是RNA sample也不是很多(一次还要load 20ul)这样下去很浪费
就可能只能做一个基因就没搞头了，不知道有没有什麽可能的改进方法
还有有人有嚐试过Reprobing的动作吗，目前试验室这个还没试出来
现在跟学长头都抱着烧了
麻烦好心人士指点迷津~~@@
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◆ From: 140.120.196.126
1F：→ hek:reprobe不会很难,重点是不要让membrane乾掉 07/06 00:41
2F：→ hek:通常0.1%SSC/1%SDS 80-90deg 10min就足以去除掉大部分的讯号 07/06 00:42