作者malakaki (神奇小馬)
看板Biotech
標題Re: [求救] western blot 全黑
時間Wed Jul 1 15:26:22 2009
請問一下, 你的二抗比例, 牌子
ECL 哪家的? P牌還是M牌?
只有這抗體會這樣, 還是每種抗體都這樣?
CS牌的 caspase 3 不錯用, 是個幾乎沒有雜訊的好物
家裡只有這支是買CS的嗎?
其他有哪些牌子呢?
※ 引述《linwei (我會好好加油^^)》之銘言：
: 請益各位
: 因為我第一次遇到這種情況@@
: 我壓的protein 是 cleaved caspase 3
: 使用的抗體是 cell signaling 編號9661 的抗體
: 今天我做實驗
: 壓出來一整片都是黑的
: 結果關燈發現整片menbrane都發亮
: 我很確定我二抗沒有給錯啦@@ 且也有很努力的wash乾淨
: 因為抗體是跟別人要的
: 且我同學他也沒有做過這個protein @@
: 有人跟我說 如果是 Polyclonal antibodies 的
: 他的專一性也會比較差
: 會是這個原因嗎?
: 該怎麼改善呢?
: 希望有做過的版友可以提供我一點意見
: 好讓我下次再試的時候知道該怎麼改進@@
: 感恩感謝～！！！！！
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 114.137.117.70
1F：推 linwei:二抗比例是 1:10000 不過牌子我不知道@@ 07/01 19:03
2F：→ linwei:ECL 是millipore的!~ 07/01 19:03
3F：→ linwei:也還有很多其他的抗體也是 cell signaling的~ 07/01 19:04
4F：→ linwei:不過其他的我壓過的倒是沒有遇過這種情形! 07/01 19:04
5F：→ malakaki:用你的條件跑我的抗體很ok 07/02 18:15
6F：→ malakaki:要不要請鄰居試試看你的抗體? 如果他也這樣, 你就換貨吧! 07/02 18:16