作者malakaki (神奇小马)
看板Biotech
标题Re: [求救] western blot 全黑
时间Wed Jul 1 15:26:22 2009
请问一下, 你的二抗比例, 牌子
ECL 哪家的? P牌还是M牌?
只有这抗体会这样, 还是每种抗体都这样?
CS牌的 caspase 3 不错用, 是个几乎没有杂讯的好物
家里只有这支是买CS的吗?
其他有哪些牌子呢?
※ 引述《linwei (我会好好加油^^)》之铭言：
: 请益各位
: 因为我第一次遇到这种情况@@
: 我压的protein 是 cleaved caspase 3
: 使用的抗体是 cell signaling 编号9661 的抗体
: 今天我做实验
: 压出来一整片都是黑的
: 结果关灯发现整片menbrane都发亮
: 我很确定我二抗没有给错啦@@ 且也有很努力的wash乾净
: 因为抗体是跟别人要的
: 且我同学他也没有做过这个protein @@
: 有人跟我说 如果是 Polyclonal antibodies 的
: 他的专一性也会比较差
: 会是这个原因吗?
: 该怎麽改善呢?
: 希望有做过的版友可以提供我一点意见
: 好让我下次再试的时候知道该怎麽改进@@
: 感恩感谢～！！！！！
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 114.137.117.70
1F：推 linwei:二抗比例是 1:10000 不过牌子我不知道@@ 07/01 19:03
2F：→ linwei:ECL 是millipore的!~ 07/01 19:03
3F：→ linwei:也还有很多其他的抗体也是 cell signaling的~ 07/01 19:04
4F：→ linwei:不过其他的我压过的倒是没有遇过这种情形! 07/01 19:04
5F：→ malakaki:用你的条件跑我的抗体很ok 07/02 18:15
6F：→ malakaki:要不要请邻居试试看你的抗体? 如果他也这样, 你就换货吧! 07/02 18:16