作者tobebetter (一個人只能全力以赴!N)
看板Biotech
標題包涵體內的蛋白質可當抗原??
時間Tue Jun 30 22:13:54 2009
不好意思我想請問,如果我的重組蛋白表現後大部分都在 inclusion body,
該重組蛋白帶有 GST tag,請問我可以純化之後直接打兔子讓它產生抗體嗎?
不懂的點在於,純化後是否''一定''要做 refolding 的動作才可以!!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 59.112.81.236
1F:→ runpapa0520:看你抗體目的。檢測用的比較沒差,要具保護力的有差。 06/30 22:51
2F:→ turtle24:看目的+1 06/30 23:11
3F:推 littlelizard:看你要做western還ELISA囉 07/01 02:33
4F:→ littlelizard:有試過不同誘導條件嗎? 在inclusion body裡不是很妙 07/01 02:35
5F:→ EsMirada:不會..在Inclusion body反而純度高..更好純化 07/01 11:55
6F:→ sdshow:我也是這樣,用denature純化(urea),但純化出來後用PBS透析 07/02 00:10
7F:→ sdshow:準備打雞,但透析後蛋白質全都變白色沉澱物,要怎讓它溶呀? 07/02 00:11
8F:→ toocool5941:urea的濃度要慢慢降,上清液收集沉澱物繼續透析 07/03 12:19