作者tobebetter (一个人只能全力以赴!N)
看板Biotech
标题包涵体内的蛋白质可当抗原??
时间Tue Jun 30 22:13:54 2009
不好意思我想请问,如果我的重组蛋白表现後大部分都在 inclusion body,
该重组蛋白带有 GST tag,请问我可以纯化之後直接打兔子让它产生抗体吗?
不懂的点在於,纯化後是否''一定''要做 refolding 的动作才可以!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 59.112.81.236
1F:→ runpapa0520:看你抗体目的。检测用的比较没差,要具保护力的有差。 06/30 22:51
2F:→ turtle24:看目的+1 06/30 23:11
3F:推 littlelizard:看你要做western还ELISA罗 07/01 02:33
4F:→ littlelizard:有试过不同诱导条件吗? 在inclusion body里不是很妙 07/01 02:35
5F:→ EsMirada:不会..在Inclusion body反而纯度高..更好纯化 07/01 11:55
6F:→ sdshow:我也是这样,用denature纯化(urea),但纯化出来後用PBS透析 07/02 00:10
7F:→ sdshow:准备打鸡,但透析後蛋白质全都变白色沉淀物,要怎让它溶呀? 07/02 00:11
8F:→ toocool5941:urea的浓度要慢慢降,上清液收集沉淀物继续透析 07/03 12:19