作者caf75722 (caf)
看板Biotech
標題[求救] Assembly PCR 與 Proofreading Polymerase 的問題
時間Sun Jun 28 00:05:30 2009
我的問題是有一段我要合成的基因序列…大約1.7kb
而我本來是用二段分開p… 因為是要合成有deletion的序列
一段是1000bp 另一段是700bp
因為做出來的是要translation所以不能有mutation
所以我要採用proofreading 的 polymerase
我主要有兩個問題
1。市面上有哪一家的proofreading enzyme 是可以跟taq相比或不會太差的
因為我用toyobo, viogene, amplicon 的不是跑不出來就是會smear，或是跑不長，
或是會出現multiple bands
2。Assembly PCR 的話，如果是用proofreading enzyme , 什麼條件會比較好??
因為公司測試也不會用assembly pcr 測試…
在此 ，誠心的請教板大
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阿根廷 才是 王道 啊 是王道啊ＷＯＲＬD－CUP
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.230.195
1F：推 alaric:Phusion DNA polymerase可以找亞醫買. 才兩個小片段容易接. 06/28 00:22
2F：→ caf75722:可以問一下…有比較便宜的嗎?? 06/28 00:27
3F：推 Rarelay:TAKARA 的 HS ？ 06/29 01:25