作者caf75722 (caf)
看板Biotech
标题[求救] Assembly PCR 与 Proofreading Polymerase 的问题
时间Sun Jun 28 00:05:30 2009
我的问题是有一段我要合成的基因序列…大约1.7kb
而我本来是用二段分开p… 因为是要合成有deletion的序列
一段是1000bp 另一段是700bp
因为做出来的是要translation所以不能有mutation
所以我要采用proofreading 的 polymerase
我主要有两个问题
1。市面上有哪一家的proofreading enzyme 是可以跟taq相比或不会太差的
因为我用toyobo, viogene, amplicon 的不是跑不出来就是会smear,或是跑不长,
或是会出现multiple bands
2。Assembly PCR 的话,如果是用proofreading enzyme , 什麽条件会比较好??
因为公司测试也不会用assembly pcr 测试…
在此 ,诚心的请教板大
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阿根廷 才是 王道 啊 是王道啊WORLD-CUP
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.230.195
1F:推 alaric:Phusion DNA polymerase可以找亚医买. 才两个小片段容易接. 06/28 00:22
2F:→ caf75722:可以问一下…有比较便宜的吗?? 06/28 00:27
3F:推 Rarelay:TAKARA 的 HS ? 06/29 01:25