作者hosaka (比別人程度差就要更努力!)
看板Biotech
標題[求救] 補平之後的ligation
時間Thu Jun 25 10:45:21 2009
補平和ligation之後 都只長少少的一兩顆
今天多了一點 只長五顆 可是都挑不到
想請問
補平之後的ligation有啥秘方嗎??可以讓我接多一點~
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.65.34
1F：推 lssunti:單邊補平？二邊？ ligation多久？溫度？ 06/25 10:46
2F：→ hosaka:單邊補平 一邊是XhoI ligation一小時 室溫 06/25 10:49
3F：推 tsubasawolfy:品質高的competent cell.. 06/25 12:01
4F：推 bluecsky:ligation RT 1hr...你對你的ligase真有信心.. 06/25 15:38
5F：→ bluecsky:一邊blunt end 一邊sticky end應該不會太過難接 06/25 15:38
6F：→ bluecsky:試試看把ligation時間拉長點看看 可考慮4度冰箱擺隔夜 06/25 15:39
7F：→ bluecsky:當然competent cell的品質影響也是很大 也可以試試 06/25 15:40
8F：推 conective:室溫ligation還ok呀 不然試試16度overnight 06/25 16:12
9F：→ seal0413:How long did you treat your DNA by klenow fragment?? 07/14 19:21