作者hosaka (比别人程度差就要更努力!)
看板Biotech
标题[求救] 补平之後的ligation
时间Thu Jun 25 10:45:21 2009
补平和ligation之後 都只长少少的一两颗
今天多了一点 只长五颗 可是都挑不到
想请问
补平之後的ligation有啥秘方吗??可以让我接多一点~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.109.65.34
1F：推 lssunti:单边补平？二边？ ligation多久？温度？ 06/25 10:46
2F：→ hosaka:单边补平 一边是XhoI ligation一小时 室温 06/25 10:49
3F：推 tsubasawolfy:品质高的competent cell.. 06/25 12:01
4F：推 bluecsky:ligation RT 1hr...你对你的ligase真有信心.. 06/25 15:38
5F：→ bluecsky:一边blunt end 一边sticky end应该不会太过难接 06/25 15:38
6F：→ bluecsky:试试看把ligation时间拉长点看看 可考虑4度冰箱摆隔夜 06/25 15:39
7F：→ bluecsky:当然competent cell的品质影响也是很大 也可以试试 06/25 15:40
8F：推 conective:室温ligation还ok呀 不然试试16度overnight 06/25 16:12
9F：→ seal0413:How long did you treat your DNA by klenow fragment?? 07/14 19:21