作者oddball (天涯宦遊人~)
看板Biotech
標題[求救] 有花紋的Polyacrylamide gel
時間Thu Jun 18 18:30:58 2009
不曉得各位是不是有同樣的經驗?
就是在下膠凝固後, 會看見膠裡呈現不規則的水紋 (波浪狀)
這些水紋不是集中在下方, 會遍及整片gel
學姊告訴我她從來沒看過這種gel @@
有沒有知道原因可能是什麼?
我們重配Tris (pH=8.8), 把水和Tris都過濾了
acrylamide是買來的, 29:1, 開新的一罐來用,
APS是現配, TEMED也是買來沒多久的 @@
最後連玻璃片都拿新的
配好的膠放在60度裡加熱一陣子
但仍然會有花紋出現 orz
拜託大家了 orz
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.52.144
1F：推 Shamino:有汽泡?? 06/18 19:12
2F：推 CErline:有漏膠的現象嗎？ 06/18 19:18
3F：推 soceress:細胞的media過濾後好像pH會改變..Tris不知會不會改變? 06/18 19:20
4F：→ soceress:配膠的混合物是左右混勻?還是用Vortex?還是用燒杯+stir? 06/18 19:22
5F：推 soceress:有沒有仔細的擦乾淨玻璃?? XD 06/18 19:24
6F：推 blence:應該不會影響band的形狀吧? 我的確會在16％以上常看到這樣 06/18 19:42
7F：→ oddball:沒有氣泡, 且漏的狀況不明顯(拆膠時不會有多的膠在玻璃外) 06/18 21:06
8F：→ oddball:不敢說完全沒漏 @@ 06/18 21:06
9F：→ oddball:混勻是用vortex, 在50ml 離心管中配 06/18 21:07
10F：→ oddball:有仔細擦玻璃 XD 06/18 21:07
11F：→ oddball:band會被影響, 我染Coomassie blue時發現會彎曲 06/18 21:08
12F：→ oddball:在重配之前所使用的Tris是沒有過濾的, 但也會有同樣情形 06/18 21:08
13F：推 ROKEE:那是漏膠 半凝時被拉扯產生的氣泡..... 06/18 21:47
14F：推 smalleg:不要vortex,TEMED的量加倍,可以的話抽一下真空,試試看 06/18 21:51
15F：→ oddball:嗯嗯 我會試試看的!! 感謝各位!! 06/18 21:53
16F：推 littlelizard:有圖可以看看嗎? 06/18 22:15
17F：→ oddball:我沒有拍下來耶 orz 06/20 17:24
18F：→ oddball:後來用parafilm封底+抽真空就變得很漂亮了~~清澈透明!! 06/20 17:24
19F：→ oddball:感謝各位~~~~ 06/20 17:24
20F：推 chvkimo:請問什麼是抽真空? 做SDS-gel怎麼抽真空? 06/20 23:15
21F：推 Duckhunter:可能是混的太過頭了，把氣泡也混進去，所以degas就好了 06/21 08:56