作者oddball (天涯宦游人~)
看板Biotech
标题[求救] 有花纹的Polyacrylamide gel
时间Thu Jun 18 18:30:58 2009
不晓得各位是不是有同样的经验?
就是在下胶凝固後, 会看见胶里呈现不规则的水纹 (波浪状)
这些水纹不是集中在下方, 会遍及整片gel
学姊告诉我她从来没看过这种gel @@
有没有知道原因可能是什麽?
我们重配Tris (pH=8.8), 把水和Tris都过滤了
acrylamide是买来的, 29:1, 开新的一罐来用,
APS是现配, TEMED也是买来没多久的 @@
最後连玻璃片都拿新的
配好的胶放在60度里加热一阵子
但仍然会有花纹出现 orz
拜托大家了 orz
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.52.144
1F：推 Shamino:有汽泡?? 06/18 19:12
2F：推 CErline:有漏胶的现象吗？ 06/18 19:18
3F：推 soceress:细胞的media过滤後好像pH会改变..Tris不知会不会改变? 06/18 19:20
4F：→ soceress:配胶的混合物是左右混匀?还是用Vortex?还是用烧杯+stir? 06/18 19:22
5F：推 soceress:有没有仔细的擦乾净玻璃?? XD 06/18 19:24
6F：推 blence:应该不会影响band的形状吧? 我的确会在16％以上常看到这样 06/18 19:42
7F：→ oddball:没有气泡, 且漏的状况不明显(拆胶时不会有多的胶在玻璃外) 06/18 21:06
8F：→ oddball:不敢说完全没漏 @@ 06/18 21:06
9F：→ oddball:混匀是用vortex, 在50ml 离心管中配 06/18 21:07
10F：→ oddball:有仔细擦玻璃 XD 06/18 21:07
11F：→ oddball:band会被影响, 我染Coomassie blue时发现会弯曲 06/18 21:08
12F：→ oddball:在重配之前所使用的Tris是没有过滤的, 但也会有同样情形 06/18 21:08
13F：推 ROKEE:那是漏胶 半凝时被拉扯产生的气泡..... 06/18 21:47
14F：推 smalleg:不要vortex,TEMED的量加倍,可以的话抽一下真空,试试看 06/18 21:51
15F：→ oddball:嗯嗯 我会试试看的!! 感谢各位!! 06/18 21:53
16F：推 littlelizard:有图可以看看吗? 06/18 22:15
17F：→ oddball:我没有拍下来耶 orz 06/20 17:24
18F：→ oddball:後来用parafilm封底+抽真空就变得很漂亮了~~清澈透明!! 06/20 17:24
19F：→ oddball:感谢各位~~~~ 06/20 17:24
20F：推 chvkimo:请问什麽是抽真空? 做SDS-gel怎麽抽真空? 06/20 23:15
21F：推 Duckhunter:可能是混的太过头了，把气泡也混进去，所以degas就好了 06/21 08:56